НЕКОТОРЫЕ ОСОБЕННОСТИ ВЗАИМООТНОШЕНИЙ XENOPSYLLA CHEOPIS (ROTHSCHILD, 1903) И ВОЗБУДИТЕЛЯ ЧУМЫ С РАЗЛИЧНЫМ ПЛАЗМИДНЫМ СОСТАВОМ

Е.Г.Токмакова, Г.А.Воронова, Л.П.Базанова, С.В.Балахонов

Иркутский научно-исследовательский противочумный институт Сибири и Дальнего Востока, 664047, Россия,

e-mail: adm@chumin.irkutsk.ru

В ряде исследований проведен сравнительный анализ блокообразования штаммами дикого типа и их производными, дефектными по плазмидному составу (Кокушкин А.М. с соавт., 1994, 1998; Hinnebusch J.B. et al., 1998; de Almeida A.M. et al., 2002), однако половые особенности блох при этом не учитывались. В данной работе оценивается образование агрегированных форм (полные и неполные блоки, "глыбки") чумного микроба, жизнеспособность блох (по их алиментарной активности и смертности) в зависимости от плазмидного состава штаммов возбудителя и пола блох.

Для заражения эктопаразитов использовали референтный для Тувинского природного очага чумы штамм И-2638 с плазмидным составом pCad, pPst, pFra, pTP33 и селекционированный от него И-3480, дефектный по плазмидному составу (pFra, pTP33). Элиминация плазмид pCad, pPst осуществлена, как описано нами ранее (Балахонов С.В. с соавт., 2004). Блох заражали на биомембране смесью равных частей крови морской свинки и 2 млрд взвеси чумного микроба, приготовленной из 48-часовой агаровой культуры, выращенной при +28⁰С. Обе группы эктопаразитов (всего 404 особи) получили по 7 подкормок на интактных белых мышах через 2–3 суток. Между подкормками блох содержали при температуре +18–20 ⁰С и влажности 70–80%. После подкормок насекомых просматривали под микроскопом при увеличении в 70 раз. Наличие агрегированных форм возбудителя в блохах визуально определяли по доле пивших блох с полной или частичной закупоркой пищеварительного тракта и оптически плотными «глыбками» возбудителя чумы на фоне алой крови в желудке. Блокированных особей после подкормок изымали из общей группы. Алиментарную активность блох оценивали по доле пивших насекомых от числа живых, а смертность – по доле мертвых от общего их количества при данной подкормке. Статистическую обработку результатов проводили стандартными методами (Рокицкий, 1967).

В группе, зараженной штаммом И-2638, выявлено 38.1% блокированных самок и 50% блокированных самцов (t=1.73, P>0.05). Среди блох, инфицированных И-3480, блокированных самцов достоверно меньше (30.5%), чем самок (44.4%, t=2.01, P<0.05). По количеству самок, блокированных разными штаммами, различий не обнаружено (t=0.9, P>0.05). Самцов с блоком преджелудка, сформированным мутантным штаммом, было значительно меньше по сравнению с самцами, блокированными диким штаммом (t=2.94, P<0.01). Если пол блох не учитывать, по способности образовывать блок преджелудка  штамм, дефектный по плазмидному составу, не отличался (36.9% блокированных эктопаразитов) от штамма дикого типа (44%,  t=1.46, P>0.05).

В среднем за подкормку среди питавшихся блох, зараженных диким штаммом, наблюдали 14% самок и 16.9% самцов с закупоркой пищеварительного тракта, среди блох, зараженных дефектным штаммом,  соответственно 12.3% и 11.4% таких особей. В течение всего опыта отмечали блох, содержавших "глыбки" возбудителя чумы. Полные и неполные блоки наблюдали со второй подкормки. В группе эктопаразитов, инфицированных штаммом дикого типа, в среднем после подкормки регистрировали 19.1% самок и 24.2% самцов с неполными блоками и "глыбками". Зараженных мутантным штаммом  – соответственно 14.7% и 25.7%. Количество насекомых с агрегированными формами  чумного микроба не зависело от пола блох и свойств штамма (при дисперсионном анализе F=0.368109 для фактора штамма, 1.193021 для пола, 0.015569 для случайной изменчивости; везде Р>0.05).

Среди блох, зараженных И-2638, в среднем за подкормку напивалось 93.6% самок и 95.8% самцов; среди зараженных И-3480 – 97.5% самок и 96.7% самцов. Пол насекомых и штамм возбудителя чумы не оказали влияния на активность их питания (при дисперсионном анализе F=2.15 для фактора штамма, 0.18 – для пола, 0.81 для случайной изменчивости; везде Р>0.05). Среднее количество погибших за подкормку самок и самцов составило соответственно 11.5% и 23.1% среди зараженных типичным штаммом и 8.6% и 24.7% – мутантным. Особенности штамма не влияли на смертность блох. Половые различия эктопаразитов, напротив, оказывали существенное влияние на этот показатель (при дисперсионном анализе F=0.01 для фактора штамма, Р>0.05; 6.86 – для пола, Р<0.05, 0.19 для случайной изменчивости, Р>0.05).

Таким образом, штамм И-3480, утративший в процессе селекции плазмиды pCad и pPst, значительно реже образовывал блок преджелудка у самцов X. cheopis по сравнению с исходным. При этом общее количество блокированных дефектным штаммом блох, не разделяемых по половому признаку, не отличалось от такового после заражения типичным штаммом. Также статистически не подтверждено влияние особенностей штамма и пола блох на визуально определяемое присутствие в них агрегированных форм микроба. Активность кровососания блох не зависела от их пола и свойств штамма микроба. Потеря двух плазмид не имела значения для смертности блох, а влияние фактора пола оказалось статистически значимым. Результаты опыта свидетельствуют о целесообразности раздельного учета экспериментальных данных для блох разного пола и необходимости продолжения исследований роли половых особенностей блох в их взаимоотношениях с возбудителем чумы.